Rozpustnost a důkaz lipidů

Lipidy jsou přírodní organické sloučeniny, které jsou produkovány jak rostlinami, tak živočichy. Jsou to deriváty vyšších mastných kyselin (se sudým počtem uhlíkových atomů) a alifatických nebo alicyklických hydroxy- nebo aminosloučenin. Vyznačují se hydrofobními vlastnostmi. Dělí se na jednoduché, mezi které patří tuky a vosky, a na složené, mezi které patří glykolipidy, fosfolipidy a další.

Úkol: Ověřte rozpustnost lipidů v různých rozpouštědlech a dokažte přítomnost lipidů v mléce.

Pomůcky: Zkumavky, stojan na zkumavky, zátky, pipety, rostlinný olej, plnotučné mléko, kádinky, trojnožka, síťka, kahan, zápalky, pipeta, filtrační papír, Petriho miska, pinzeta, skleněná tyčinka.

Chemikálie: H2O, technický benzín (H225 hořlavina, H304 toxický při vdechnutí, H336 způsobuje ospalost a závratě, H411 toxický pro vodní organismy), aceton (H225 hořlavina, H319 dráždí oči, H336 způsobuje ospalost a závratě), ethanol (H225 hořlavina), diethylether (H224 hořlavina, H302 zdraví škodlivý při požití, H336 způsobuje ospalost a závratě), ethanolový roztok činidla Sudan III (H314 leptá kůži a poškozuje oči, H302 zdraví škodlivý při požití, H341 možný mutagen, H373 poškozuje orgány při opakované expozici).

Pracovní postup:

• Připravte si 4 zkumavky a každou označte symbolem jednoho rozpouštědla - voda, benzín, aceton, ethanol.
• Do každé ze zkumavek pomocí pipety převeďte 1 ml rostlinného oleje.
• Následně přidejte do zkumavek podle označení 5 ml rozpouštědla.
• Zkumavky uzavřete zátkou a dobře je protřepte. Pozorujte změny.
• Důkaz lipidů.
• Do kádinky pomocí pipety převeďte 5 ml plnotučného mléka.
• Následně na mléko pomocí pipety navrstvěte 1 ml ethanolu, umístěte kádinku na trojnožku se síťkou a zahřívejte pomocí kahanu asi minutu.
• Opatrně sejměte kádinku z trojnožky (!! Je horká, vhodné je použít hadr, nebo termoizolační rukavice). Ochlaďte ji z vnějšku proudem vody ve výlevce.
• Po ochlazení přidejte pomocí pipety 4 ml diethyletheru a promíchejte skleněnou tyčinkou.
• Vyčkejte do oddělení fází a následně odeberte pipetou vrstvu diethyletheru a naneste ji na filtrační papír.
• Pro tento krok je vhodné použít ochranné rukavice. Diethylether nechte na vzruchu odpařit a sledujte změny na papíře. Poté ponořte filtrační papír do ethanolového roztoku činidla Sudan III na dvě minuty. Vyjměte jej pomocí pinzety a oplachujte jej ethanolem tak dlouho, dokud se nevymyje přebytečné barvivo. Pozorujte změny.
• Umyjte použité laboratorní nádobí, ukliďte pracovní stůl a předejte jej vyučujícímu.

Obsah protokolu:

Po dokončení práce zpracujte protokol z laboratorní úlohy, který bude obsahovat následující náležitosti:

• Jméno a příjmení, třída, datum.

• Název a cíl práce.

• Stručný pracovní postup včetně popisu sledovaných změn.

• Přehlednou tabulku s uvedením ne/rozpustnosti lipidů v jednotlivých rozpouštědlech.

• Odpovědi na následující otázky:

  • Po rozdělení dvou fází v kádince při reakci důkazu lipidů v mléce je diethyletherová vrstva horní nebo dolní?

  • Zjistěte chemické složení činidla Sudan? Jaký je princip důkazu lipidů pomocí tohoto činidla? Hledejte jej v jeho rozdílné rozpustnosti v polárních a nepolárních látkách.

  • Pokuste se formulovat obecné tvrzení o rozpustnosti lipidů - ve kterých rozpouštědlech jsou lipidy dobře rozpustné (polární/nepolární)?

• Závěr.